全自動(dòng)樣品快速研磨儀對(duì)水稻葉片的前處理實(shí)驗(yàn)研磨操作

　　摘要：全自動(dòng)樣品快速研磨儀對(duì)水稻研磨葉片研磨實(shí)驗(yàn)主要目的是滿足分子標(biāo)記輔助育種中基因型鑒定、基因克隆、測(cè)序的需要，本研究借用棉簽等具吸附功能的材料代替移液器，依次直接在2種DNA提取液中操作，建立了一種簡(jiǎn)單、快速、環(huán)保的水稻葉片DNA提取方法。結(jié)果表明，提取溶液通過(guò)PCR擴(kuò)增，滿足基因擴(kuò)增對(duì)模板的要求。

　　同時(shí)，對(duì)其進(jìn)行了靈敏度測(cè)試，稀釋107倍仍然能夠擴(kuò)增出目標(biāo)片段；最后通過(guò)PCR、克隆載體連接等分子生物學(xué)手段，驗(yàn)證此方法也滿足測(cè)序的需要。本方法能夠在90s內(nèi)完成植物葉片DNA的提取，解決了目前植物基因組DNA提取方法需要離心機(jī)等昂貴特殊設(shè)備、提取步驟繁鎖、提取過(guò)程中刺激味大、提取時(shí)間長(zhǎng)等問(wèn)題，有利于大規(guī)模開展分子標(biāo)記輔助育種中材料基因型的鑒定，具有簡(jiǎn)單、快速、廉價(jià)、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。

　　實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>擬測(cè)試全自動(dòng)樣品快速研磨儀對(duì)水稻葉片的前處理研磨效果

　　1.測(cè)試對(duì)象：上海凈信全自動(dòng)樣品快速研磨儀，型號(hào)為JXFSTPRP-24L

　　2.工作原理：樣品（水稻葉片）放入離心管中，放入研磨球，通過(guò)研磨儀的高速上下振蕩帶動(dòng)研磨珠進(jìn)行粉碎樣品。

　　3.實(shí)驗(yàn)器材：上海凈信全自動(dòng)組織研磨儀主機(jī)，水稻葉片若干，離心管和不銹鋼研磨珠兩顆，提取試劑

　　水稻葉片樣品前處理研磨實(shí)驗(yàn)操作步驟：

　　一、需要根據(jù)樣品量及樣品實(shí)驗(yàn)研磨需求，去對(duì)組織研磨儀設(shè)備的程序參數(shù)的研磨頻率及研磨時(shí)間進(jìn)行設(shè)置

　　二、需要把水稻葉片剪成小段后，再放入凈信離心管中，再在離心管內(nèi)加入適量的氧化鋯珠和相應(yīng)提取試劑

　　三、再把離心管放入機(jī)器的適配器中，但需要注意對(duì)適配器的配平和緊固，再鎖蓋

　　四、啟動(dòng)設(shè)備，即可開始程序的運(yùn)轉(zhuǎn)研磨

　　五、待程設(shè)備程序停止運(yùn)轉(zhuǎn)后，即可完成樣品粉碎，便可獲得磨后的樣品效果

　　水稻葉片樣品前處理研磨實(shí)驗(yàn)效果：

　　研磨前后效果圖

　　注：全自動(dòng)樣品快速研磨儀在針對(duì)樣品葉片的研磨時(shí)，需要盡可能的添加提取試劑，讓樣品在實(shí)驗(yàn)研磨過(guò)程中有液體的情況下，可使樣品研磨效果會(huì)更加的充分。