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實(shí)驗目的:此次實(shí)驗是對豬皮組織為實(shí)驗樣品進(jìn)行的前處理實(shí)驗研磨破碎,以便對豬皮組織樣品內的膠原蛋白或細胞進(jìn)行提取純化,并對其在藥物方向的應用進(jìn)行實(shí)驗研究。
實(shí)驗設備:浸入式液氮冷凍研磨儀 JXFSTPRP-MiniCL
豬皮組織樣品前處理的實(shí)驗操作步驟:
1.需要提前備好實(shí)驗樣品前處理設備、研磨罐及其配置適用的研磨珠和處理好的(脫脂)豬皮組織樣品
2.取處理好的豬皮組織樣品將其剪切成小塊狀,放入研磨罐中,加入適用規格數量的研磨珠,蓋子蓋上
3.把研磨罐放入研磨儀中進(jìn)行固定,但要注意兩端的配平,扣好安全鎖,而后將研磨儀整個(gè)放入液氮中進(jìn)行預冷。
4.設置好儀器設備的運行程序參數,啟動(dòng)儀器,開(kāi)啟儀器程序的運轉(要嚴格按照程序設置,不然容易發(fā)生短路;在儀器運行過(guò)程中要注意液氮盛放桶蓋要壓緊,桶中液氮余量要高于研磨罐的位置)在儀器程序結束后,即可得到破碎完成的豬皮組織樣品
5.把破碎后的樣品放入玻片上在顯微鏡下觀(guān)察直徑約20~70μm
實(shí)驗注意事項:
1.實(shí)驗時(shí)需要將豬皮破碎成較小的碎片,直徑大約20mm左右 。
2.實(shí)驗過(guò)后研磨罐及撞子可用酒精或在超聲波清洗機中進(jìn)行清洗消毒,烘干備用。
3.實(shí)驗過(guò)程中,樣品的體積不能超過(guò)研磨罐的三分之一,留出足夠的空間讓撞子充分運動(dòng)。
豬皮組織樣品前處理實(shí)驗研磨效果對比圖:
浸入式液氮冷凍研磨儀對豬皮組織樣品的前處理效果由上圖可知;由于豬皮組織f韌性好,處理過(guò)程繁瑣,需要在低溫中進(jìn)行,在經(jīng)過(guò)液氮的低溫預冷,短時(shí)間內便已完成對豬皮組織樣品的前處理實(shí)驗操作且,能滿(mǎn)足樣品的實(shí)驗要求。
浸入式液氮冷凍研磨儀對動(dòng)物組織樣品的液氮低溫研磨,能有效抑制核酸降解,保留酶的生物活性,更好地保護樣品。出料顆粒相較于手工研磨更細膩均勻,出料量也有明顯提升。提取出的組織成分在數量和質(zhì)量上比常規研磨效果更好。