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實(shí)驗目的:此次實(shí)驗樣品為小鼠肝臟細胞核,為進(jìn)一步提高樣品超聲破碎的實(shí)驗效率和效果的準確性,獲得高質(zhì)量的基因組數據;此次實(shí)驗選用凈信科研者的高通量聲波基因組剪切儀設備對樣品細胞核進(jìn)行實(shí)驗前處理。
實(shí)驗設備:高通量聲波基因組剪切儀 JXDNA-500PICO
小鼠肝臟細胞核樣品前處理實(shí)驗研磨操作過(guò)程:
1.在實(shí)驗開(kāi)始前,需要先將冷水機設備注滿(mǎn)純水;另外再做實(shí)驗之前還需要先打開(kāi)冷水機設備,對其進(jìn)行預冷處理
2.在打開(kāi)高通量聲波基因組剪切儀的主機電源后,需要讓水保持循環(huán)狀態(tài),直到達到4℃之后方可使用
3.在實(shí)驗設備達到預定的溫度之后,即可根據樣品的實(shí)驗需求去對設備的程序參數進(jìn)行調節設置
4.把裝有樣品的離心管以對稱(chēng)的形式放入儀器的適配器內
5.對儀器程序的超聲模式需設為間歇超聲,超聲20s,間歇10s
6.待剪切儀使用完畢后,關(guān)閉冷水機與剪切儀電源,并將適配器擦干后安全放置
實(shí)驗操作注意事項:
1.每周至少換一次純水
2.儀器運轉時(shí)不可用外力強迫適配器旋轉馬達停止
3.超聲水槽內必須保證有水才可以啟動(dòng)超聲,不可無(wú)水超聲
4.冷水機的設定溫度是4℃,后期使用無(wú)需再次設置,打開(kāi)電源即可
5.超聲波水槽不可用尖銳物品碰觸或刮擦,不可加入高鹽或腐蝕性液體
小鼠肝臟細胞核樣品前處理實(shí)驗超聲打斷結果:
高通量聲波基因組剪切儀對小鼠肝臟細胞核樣品的超聲實(shí)驗處理效果由上圖可看出,實(shí)驗設備對樣品的前處理實(shí)驗超聲打斷結果良好,可滿(mǎn)足樣品的實(shí)驗需求,能夠進(jìn)一步提高樣品細胞超聲波破碎的實(shí)驗效率和效果的準確性,能夠獲得高質(zhì)量的基因組數據。
高通量超聲波基因組剪切儀采用等溫、非接觸的方式可對樣品進(jìn)行打斷、勻漿和混合;實(shí)驗設備主要用于細菌細胞破碎、蛋白質(zhì)抽提、二代測序樣本DNA片段化、免疫共沉淀等實(shí)驗,它具有聲波聚焦,高效率低能耗、實(shí)驗重復性好、得率高等優(yōu)勢;高通量超聲波基因組剪切儀采用4℃低溫水浴超聲波,能量分布均勻,且能夠同時(shí)處理30個(gè)樣品,被廣泛用于分子生物學(xué)實(shí)驗中。