ibidi流體剪切力實驗|通道載玻片串連方法步驟

　　ibidi流體剪切力實驗應(yīng)用逐步說明了如何串聯(lián)連接多個Luer-Slides。優(yōu)點是僅使用一個流體單元即可觀察和培養(yǎng)多個載玻片。當(dāng)使用相同規(guī)格的載玻片時，載玻片中的流速是相同的。也可以通過連接不同高度的載玻片來改變剪切速率。

　　本次介紹了兩個載玻片連接的過程。但是它可以應(yīng)用于大量的載玻片。

　　將一個塑料連接器插入通道載玻片的兩端（6厘米），以在載玻片之間連接起來。下圖是在兩端帶有兩個配套的Luer公接頭的連接器管?？捎靡掖蓟蚋邏簻缇窘宇^。

　　*必須在無菌條件下執(zhí)行以下步驟！

　　3. 播種細胞　　

　　· 準備1.67 · 106 cells/ml.的細胞懸液。　　

　　· 將150 µl注入通道。僅填充通道體積（圖1a）。　　

　　· 將帽蓋在Luer接頭上，并將載玻片放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)半小時來固定細胞?！　?/p>

　　· 細胞固定后，將兩邊儲液接口各加60 µl充滿。

　　4. 連接載玻片　　

　　現(xiàn)在準備載玻片，使細胞在通道中生長，并向儲液池中填充60 µl無細胞培養(yǎng)基（請參見第3節(jié)）。　　

　　· 在連接之前，將所有儲液器各加60 µl（圖1b）?！　?/p>

　　· 將連接器管的一個Luer適配器插入載玻片的一個母Luer適配器中（圖1c）?！　?/p>

　　· 將一些預(yù)備的培養(yǎng)基吸入注射器。倒轉(zhuǎn)注射器并將多余的空氣推出（圖1d）?！　?/p>

　　· 使用沒有氣泡的注射器在載玻片端口注入?？赡軙行┮绯觯▓D1e）。　　

　　小心地將液體注入載玻片，直到連接器管中充滿為止（圖1f）

　　圖1：（a）接種細胞時的用量； （b）載玻片在連接之前已*填滿； （c）載玻片中插入連接管； （d）無氣泡的注射器； （e）將注射器插入載玻片一端； （f）用注射器推動介質(zhì)來填充連接器管道　

　　· 當(dāng)連接器管道*充滿時（圖2a），將其插入第二張載玻片的接口上（圖2b-d）?！　?/p>

　　· 如果要連接兩個以上的載玻片，將第二個連接器管放在第二個載玻片空的另一端口上，用注射器推入介質(zhì)，依此類推?！　?/p>

　　· 慢慢連接的所有載玻片將注射器從適配器上卸下（圖2e）?！　?/p>

　　· 要將載玻片連接到灌注套件，兩個Luer容器必須在頂部填充培養(yǎng)基。可用紙巾擦去過多的培養(yǎng)基?！?/p>

　　圖2：（a）連接管已*充滿； （b-c）將連接器管插入第二載玻片的魯爾接頭上； （d）帶有適配接頭管連接； （e）取下注射器； （f）擦去溢出的介質(zhì)，并填充儲液罐以連接到灌注套件。

　　5. 連接到灌注裝置　　

　　將載玻片連接到灌注套件

　　圖片串聯(lián)安裝帶有兩個µ-Slides I Luer的一個流體單元。